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Ensaios in vitro

Ensaios in vitro

O CIEnP oferece estudos em cultura de células primárias e imortalizadas. Nossa equipe científica provê uma grande variedade de ensaios validados, além de proporcionar suporte ao desenvolvimento de produtos, atuando em conjunto com o patrocinador para seleção do estudo apropriado para a proposta. Consulte nosso catálogo de linhagens e disponibilidade de culturas primárias.

Ensaios oferecidos
A lista mostra apenas alguns dos serviços disponíveis. Contate nossa equipe para discutir ensaios específicos de acordo com a necessidade do seu desenvolvimento.
  • Avaliação de citotoxicidade
  • Avaliação de apoptose
  • Avaliação de proliferação celular
  • Avaliação de ciclo celular
  • Avaliação de potencial de membrana mitocondrial
  • Quantificação de biomarcadores (qPCR ou ELISA)
  • Quantificação de citocinas
  • Avaliação do estresse oxidativo
  • Imunomarcações

  • Fenotipagem celular (citrometria de fluxo)
  • Ensaios de estimulação ou ativação celular
  • Ensaios de migração ou invasão celular
Banco de linhagens
  • A549 (células epiteliais alveolares de carcinoma humano)
  • Caco-2 (células de adenocarcinoma colorretal humano)
  • HEK-293 (células embrionárias de rim humano)
  • HEKn (queratinócitos de humano)
  • HDFn (fibroblastos de humano)
  • HEMn-MP (melanócitos de humano)

  • L-929 (fibroblastos de camundongo)

  • RAW 264.7 (macrófagos de camundongo)

  • Outras sob consulta.

Cultura de células primárias
  • Células neuronais (E18)
  • Células gliais (E18)

  • Células do lavado broncoalveolar

  • Células do lavado peritoneal

  • Macrófagos derivados de medula óssea

  • Esplenócitos

  • Linfócitos

  • Hepatócitos

  • Outras sob consulta.

Desenvolvimento de dermocosméticos
O CIEnP oferece suporte completo para a avaliação de ingredientes utilizados em produtos dermocosméticos, desde o teste de pré-formulações até os ensaios de eficácia e segurança necessários para a condução de estudos clínicos. Os métodos baseados em monocamadas celulares, por exemplo, apresentam excelente custo-benefício e podem funcionar como ponto de partida para o desenvolvimento. Para este tipo de produto, o CIEnP somente utiliza métodos in vitro e que não contêm material de origem animal.
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Ensaios de eficácia

Os ensaios de eficácia para cosméticos podem ser realizados nas principais células que constituem a pele, como fibroblastos, queratinócitos ou melanócitos, mas também em sistemas não celulares, a fim de verificar atividade antioxidante, ativadores ou inibidores enzimáticos, dentre outros. Para mais detalhes sobre os ensaios, clique aqui.

  • Efeito anti-envelhecimento
  • Efeito antioxidante

  • Efeito hidratante

  • Efeito calmante

  • Reparo da pele

  • Firmeza da pele

  • Pigmentação da pele

Ensaios de segurança

Os testes de citotoxicidade avaliam o potencial tóxico sobre cullturas de células humanas (guia n° 129 da OECD e ISO 10993-5). Esses são os primeiro testes realizado para prover informações confiáveis sobre a segurança de dermocosméticos e produtos químicos. Os efeitos tóxicos em nível celular podem ser identificados por diferentes ensaios:

  • Ensaio de citotoxicidade com captação do vermelho neutro
  • Ensaio de citotoxicidade com MTT

  • Ensaio de apoptose

  • Teste de irritação da pele (guia nº 439 da OECD)

Ensaio de liberação da substância ativa

'O teste de liberação de ativo consiste na avaliação da liberação do princípio ativo de uma formulação tópica utilizando um Sistema de Difusão Vertical (Célula de Franz), equipado com uma membrana sintética adequada. Este ensaio é realizado de acordo com diretrizes da FDA.

Ensaio de permeação cutânea

Este ensaio é utilizado para avaliar a absorção cutânea após a exposição tópica de ativos ou de produtos acabados (dermocosméticos). O teste de absorção cutânea é realizado em fragmentos de pele humana utilizando um Sistema de Difusão Vertical (célula de Franz) e pode ser realizado com diferentes apresentações farmacêuticas, como líquidas, sólidas, semissólidas, pastas, géis e cremes. O ensaio é realizado de acordo com o guia n° 428 da OECD e o suprimento e o uso de tecido humano estão em plena conformidade com as orientações éticas nacionais.

syringe with red liquid
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Ensaios de mecanismo de ação

Estudos de mecanismo de ação são usados ​​para alcançar uma compreensão aprofundada dos alvos moleculares e identificar vias e alvos envolvidos nos efeitos farmacológicos de uma substância de interesse. Para ver as opções disponíveis no CIEnP, clique aqui.

Eficácia de dermocosméticos
Efeito hidratante
  • Determinação de ácido hialurônico e atividade da hialurionidase

  • Expressão de aquaporina

Efeito calmante
  • Avaliação da produção/liberação de citocinas (IL-1β, IL-6, IL-8 e TNF-α)

  • Quantificação de PGE2

Reparo da pele
  • Expressão e atividade de metaloproteinases

  • Quantificação de colágeno

  • Migração in vitro (queratinócitos)

  • Proliferação in vitro (queratinócitos e fibroblastos)

Efeito antioxidante
  • Determinação intracelular de espécies reativas de oxigênio

  • Avaliação dos níveis de glutationa

  • Atividade sequestradora de radical livre

  • Avaliação de atividade antioxidante pelo método DPPH

  • Proliferação celular

  • Regulação do ciclo celular

  • Atividade sequestradora de radical livre

  • Avaliação da matriz extracelular e metaloproteinases

Firmeza
  • Quantificação de colágeno

  • Atividade da elastase

  • Expressão e atividade de metaloproteinases

  • Ensaio de proliferação celular

Pigmentação
  • Expressão de TRP-1, TRP-2, MC1R e MITF

  • Atividade da tirosinase

  • Produção de melanina

Efeito anti-envelhecimento
  • Avaliação de atividade antioxidante após estímulo com UVB e peróxido de hidrogênio

  • Avaliação de atividade antioxidante pelo método DPPH

  • Avaliação dos níveis de glutationa

  • Apoptose

A eficácia de dermocosméticos pode ser demonstrada através da combinação de diversas técnicas, como western blotting, PCR em tempo real, ensaios colorimétricos, ensaios enzimáticos, imunocitoquímica, imunofluorescência e citometria de fluxo. Entre em contato conosco para discutir os seus objetivos específicos. Abaixo estão alguns dos ensaios realizados no CIEnP.
black and yellow plastic toy
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Avaliação in vitro do mecanismo de ação

Estudos de mecanismo de ação identificam e/ou sugerem as interações bioquímicas específicas pelas quais uma ou mais substâncias ativas produzem um efeito farmacológico. De maneira geral, a avaliação in vitro pode ser realizada através da combinação de diferentes estratégias:

Esses estudos podem ser integrados a outros ensaios para maior custo-benefício ou realizados de maneira independente. Entre em contato com a equipe do CIEnP para discutir a melhor estratégia para o desenvolvimento do seu produto.

  • Análise da alteração do perfil de expressão gênica (PCR e PCR array)

  • Avaliação de vias de sinalização e receptores através de imunomarcações (imunofluorescência, imunocitoquímica)

  • Ensaios de ELISA, cytometric bead array (CBA), western blotting e ensaios colorimétricos e enzimáticos em geral

  • Utilização de agonistas e antagonistas

  • Transfecção de células com canais iônicos

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